Определение группы крови цоликлонами

Метод использования цоликлонов для определения группы крови и резус-фактора считается основным. В отличие от стандартных сывороток реагенты дают более выраженный результат, само исследование занимает всего несколько минут. Так что лаборант, использующий моноклональные антитела, может выполнить за рабочий день большее количество проверок.

Что из себя представляют реагенты

Цоликлоны – моноклональные антитела, которые относят к иммуноглобулинам М-класса. Жидкость продают во флаконах, которые могут иметь объём 5 и 10 мл. Реагенты ускоряют реакцию агглютинации – то есть вступают во взаимодействие с агглютиногенами (компонентами на верхнем слое эритроцитов). Склеивание веществ и выпадение их в осадок считают положительным результатом.

Цоликлоны – продукт генной инженерии. Получить их помогают мыши. Мышам вводят специальный антиген, затем у них забирают асцитную жидкость, в которой как раз и содержатся цоликлоны.

Разновидности

Есть 3 основных вида – каждый имеет особую окраску:

• Цоликлон Анти-А – раствор красного цвета.

• Анти-B – жидкость синего цвета.

• Анти-AB – бесцветный раствор.

Каждый реагент вступает в реакцию со «своим» антигеном, благодаря чему можно определить группу крови и резус. Анти-D позволяет узнать резус фактор. А чтобы выявить только группу крови, достаточно первых трех препаратов.

Как проводится исследование?

Исследование проводят в лабораторных условиях в хорошо освещаемом помещении при температуре от +15° до +25°. Помимо самих цоликлонов нужны капиллярная кровь обследуемого и планшет – приспособление с небольшими углублениями, в которых и будут происходить реакции.

Лаборант действует так:

• Наносит по капле Анти-А и Анти-В на планшет.

• К каждому веществу добавляет по капле крови. Объём крови должен быть в 10 раз меньше объёма реагента.

• Размешивает кровь и препарат, затем покачивает планшет в течение 3 минут.

По истечении этого времени появляется результат, который выражается агглютинацией. Мелкие красные хлопья на планшете видны невооружённым глазом.

Интерпретация результатов

Чтобы интерпретировать результаты исследования, лаборанту достаточно заглянуть в следующую таблицу:

Анти-А Анти-B

I группа - -

II группа + -

III группа - +

IV группа + +

По сути, результаты определения группы крови цоликлонами по системе AB0 означают следующее:

• Агглютинации не случилось ни с одним цоликлоном - группа крови первая.

• Склеивание эритроцитов произошло только с Анти-А – вторая группа.

• Реакция наблюдается только с Анти-В – значит, группа крови третья.

• Агглютинация случилась с обоими препаратами – обследуемый предположительно обладает кровью редкой четвертой группы.

Почему предположительно? Такой же результат может быть у человека, имеющего заболевание крови. Поэтому лаборант проводит дополнительный тест - смешивает кровь с физиологическим раствором в том же соотношении, что и с моноклональными антителами (10 к 1). Если реакция отсутствует, обследуемый может выдохнуть с облегчением – болезни крови у него нет.